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gel Ni-NTA 亲和层析介质
产品简介

gel Ni-NTA 亲和层析介质,金属螯合亲和层析,又称固定化金属离子亲和层析(, IMAC) 。艾谱瑞金属螯合介质 GLK-gel Ni-NTA 是将氮川三乙酸(NTA)键合在琼脂糖的亲和层析介质。具有吸附容量大、选择性好、分辨率高、易于再生、成本较低等优点,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化,尤其是His-tag标记蛋白质的分离纯化。

产品型号:GLK-gel Ni-NTA
更新时间:2026-10-10
厂商性质:生产厂家
访问量:15
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Ni-NTA 亲和层析介质金属螯合亲和层析,又称固定化金属离子亲和层析(Immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC) 。艾谱瑞金属螯合介质 GLK-gel Ni-NTA 是将氮川三乙酸(NTA)键合在琼脂糖的亲和层析介质。具有吸附容量大、选择性好、分辨率高、易于再生、成本较低等优点,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化,尤其是His-tag标记蛋白质的分离纯化。

一、GLK-gel Ni-NTA 亲和层析介质规格:

参数

GLK-gel Ni-NTA

GLK-gel Ni-NTA+

基材类型

6%交联琼脂糖凝胶

粒径分布 μm

45-165

24-44

配基密度 μmol/mL

12-18

~15

动态载量 mg 6xHis-tagged protein/mL

>30

>30

最高耐压(MPa)

0.3

pH 稳定性

3-12(工作),2-14(CIP ,脱去金属离子)

建议流速 cm/h

<150

GLK-gel Ni-NTA 亲和层析介质试剂耐受情况

试剂种类

耐受时间

0.01 M HCI ,0.1 M NaOH , 8M 尿素,6M 盐酸胍

1 week   40℃

1 M NaOH, 70%醋酸

12 hours   40℃






    二、产品原理

NTA 四齿配体共价键合在琼脂糖微球上,螯合固定 Ni²⁺离子;在中性 pH 条件下,Ni²⁺可与重组蛋白上 6 个连续His-tag形成配位键结合;提高咪唑浓度或降低 pH,即可竞争性洗脱目的蛋白。

NTA 相比 IDA(三齿):金属离子泄漏更少,样品中低浓度 EDTA 耐受更强,纯化产物镍残留更低。

   三、适用场景

  1. 大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞表达的His 标签重组蛋白一步纯化;

  2. 重力柱、蠕动泵、AKTA 等层析系统;批次吸附(batch)、柱层析两种操作模式;

  3. 蛋白固定化、酶固定化工艺开发(文献中可用于融合肝素酶固定化);

  4. 科研样品制备、生物药上游中间体纯化。

   四、产品优势

  1. 高机械强度琼脂糖骨架,高流速,耐 CIP 清洗,循环使用次数高;

  2. 载量优于进口经典 Ni-NTA,国产替代成本优势明显;

  3. 两种粒径可选:90μm 适合大体积粗样品快速捕获;37μm 细颗粒适合精细纯化、提升产物纯度;

  4. 广谱化学兼容性,可使用去污剂、还原剂(β-ME、TCEP);

   五、标准操作要点

  1. 平衡缓冲液:20 mM 磷酸盐,0.5 M NaCl,pH7.5~8.0(可添加 10~30 mM 咪唑减少杂蛋白非特异吸附);

  2. 洗脱缓冲液:平衡缓冲液 + 250~500 mM 咪唑;

  3. 再生:0.5 M EDTA 洗脱掉残留金属,重新上 Ni²⁺离子完成再生;

  4. 清洗:0.1~1M NaOH 在位清洗,去除顽固蛋白 / 内毒素。


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